*Corresponding author 서 론
장미과 사과나무속에 속하는 사과(Malus domestica)의 국내 재배면적은 32,954 ha이며, 생산량은 535,324톤으로(Korean Statistical Information Service, 2019) 과수 중 가장 많은 비중을 차지하고 있어 경제적으로 국내뿐만 아니라 전 세계적으로 매우 중요한 과수이다. 하지만 사과에서 발생되는 바이러스는 사과 생산을 지속시키기 위한 연구 개발에 많은 제약을 준다(Hadidi와 Barba, 2011).
현재 인과류(pome)에 발생하는 바이러스 또는 바이러스와 유사한 병은 약 340종 이상이며, 사과나무에는 적어도 12종의 바이러스 또는 바이러스와 유사한 병에 감염되어 심각한 경제적 손실을 발생시킨다(Németh, 1986; Nisar, 2013; Saade 등, 2000). Apple mosaic virus (ApMV)에 감염된 사과나무는 봄에 어린잎의 엽맥을 따라 옅은 노란색의 불규칙한 반점이 생길 수 있으며, 잎은 조기 낙엽된다. 증상의 정도는 봄철 기온이 따뜻한 시기에 더욱 심하며 대부분의 상업용 사과 품종에서 발생하며 발생 정도는 품종마다 다양하다(Dursunoglu와 Ertunc, 2008; Posnette와 Cropley, 1956). Apple stem pitting virus (ASPV), Apple stem grooving virus (ASGV), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV)의 경우 일반적으로 증상이 잘 나타나지 않으며, 대부분 복합 감염의 형태로 발생한다. 또한 감수성 대목을 사용한 사과나무에서 고접병을 유발하기도 하는 것으로 알려져 있다(Hirata 등, 2003; Pasquini 등, 1998; Yanase 등, 1989).
바이러스와 마찬가지로 바이로이드 역시 사과나무에 피해를 주고 있는데 그중 Apple scar skin viroid (ASSVd)는 과실 표피에 얼룩덜룩한 증상을 나타내며 주로 붉은색 품종의 사과 과실에서 많이 발생을 한다(Yamaguchi와 Yanase, 1976).
이렇게 다양한 피해를 주는 바이러스 및 바이로이드는 현재까지 마땅한 치료방법이 개발되어 있지 않으며, 이미 많은 사과원에 발생하고 있으나, 정확한 감염률 및 피해 정도에 대해서는 사과를 재배하는 대부분의 농업인도 알고 있지 못한 실정이다. 따라서 이런 문제를 해결하기 위해서 주요 산지에서 재배되고 있는 사과원을 대상으로 바이러스 및 바이로이드 5종의 감염률을 조사하였다.
재료 및 방법
감염 현황 조사.
사과원의 바이러스 및 바이로이드 감염 현황을 조사하기 위해 2018년 7월 12일 3개의 팀으로 나누어 강원 정선 4농가, 충북 단양 3농가, 충남 예산 3농가, 전북 장수 3농가, 무주 3농가에서 각 농가별로 1-3품종을 대상으로 품종당 30주씩, 전체 780주의 사과나무를 채집하여 바이러스 및 바이로이드의 감염 검사를 수행하였다(Table 1). 사과나무에서는 이미 바이러스와 바이로이드가 많이 발생되고 있지만, 본 연구에서는 그 중 대표적인 바이러스 ACLSV, ASPV, ASGV, ApMV 4종과 바이로이드는 ASSVd 1종만을 대상으로 시험을 수행하였다.
바이러스 및 바이로이드 검정.
사과나무의 신초를 채집하여 GeneAll의 ribospin total RNA isolation kit (Seongnam, Korea)을 사용하여 RNA를 추출하였으며, 과정은 GeneAll에서 제시한 protocol에 준하여 진행하였다. 추출한 RNA는 Intron의 ONE-STEP RT-PCR Premix kit (Seoul, Korea)을 사용하여 cDNA 합성 및 PCR 증폭을 하였으며 사용된 프라이머는 Table 2와 같다.
결과 및 고찰
강원, 충북, 충남, 전북의 16개 사과원을 대상으로 바이러스 및 바이로이드 5종의 감염 조사 결과(Tables 3, 4), 전체 바이러스 및 바이로이드 감염률은 97.3%로 대부분의 사과나무가 감염되어 있었으며, 감염되지 않은 사과나무의 비율은 2.7%인 것으로 나타났다. 바이러스 및 바이로이드 종류별 감염률은 ASGV 93.4%, ASPV 85.7%, ACLSV 59.0%, ASSVd 6.7%, ApMV 3.6% 순으로 ASGV가 가장 높았고 ApMV가 가장 낮은 것으로 조사되었다. 바이러스 및 바이로이드에 단독 또는 복합 감염 조사결과(Table 5), 바이러스 및 바이로이드 단 1종만 감염된 비율은 12.4%였으며, 2종 이상 복합 감염된 비율은 84.8%로 복합감염의 비율이 단독 감염에 비해 약 7배 가까이 되는 것으로 조사되었다.
Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV).
ACLSV의 전국 감염률은 59.0%였으며, 지역별로 보면 충북 단양지역이 78.3%로 가장 높았고, 전북 무주지역이 44.5%로 가장 낮은 감염률을 보였다. 또한 사과원별로 보면 조사 주수가 100% 감염된 사과원이 2곳이었으며, 6.7%의 감염률을 보인 사과원이 가장 낮은 것으로 조사되어 사과원별로 감염률의 편차가 심한 것으로 조사되었다. 또한 동일 사과원 내에서 후지와 홍로의 감염률은 5농가 중 4농가의 홍로 감염률이 높게 나타났다.
ACLSV는 1959년 미국의 사과나무에서 처음으로 보고되었으며(Burnt 등, 1996), 사과, 복숭아, 배, 자두, 체리, 살구 등을 감염시킨다(Lister, 1970; Németh, 1986). ACLSV에 감염되면 대부분의 사과 품종은 30-40% 손실이 발생하며 감염률은 80-100%까지 보고가 되어 있는데(Cembali 등, 2003; Nemchinov 등, 1995; Wu 등, 1998), 본 연구에서 ACLSV의 전국 감염률은 59.0%로 80-100%에 미치지 못하지만 일부 사과원의 감염률이80% 이상으로 조사되어 향후 감염률이 더 올라갈 수 있을것으로 판단된다.
Apple stem pitting virus (ASPV).
ASPV의 감염 현황 조사 결과, 전체 감염률은 85.7%였고, 충북 단양지역의 경우 99.7%로 감염률이 가장 높았으며, 전북 무주지역은 69.9%로 가장 낮은 감염률을 보였다. 또한 지역별로 보면 전체 16개 사과원 중 7개 사과원은 ASPV에 100% 감염이 되어 있는 것을 확인할 수 있었으며, 나머지 과원들도 50% 이상이 감염되어 ASPV의 감염률이 전국적으로 매우 높은 것으로 조사되었다. 특히 ASPV는 ACLSV와 ASGV와 함께 복합 감염되는 경우가 많은데(Ji 등, 2013; Leone 등, 1998; Wang 등, 2010), 본 연구에서도 3종의 바이러스가 복합 감염된 경우는 56.2%로 조사 주수의 절반 이상이 ASPV, ACLSV, ASGV 3종에 복합 감염되어 있었다.
Apple stem grooving virus (ASGV).
ASGV는 본 연구의 조사 대상인 바이러스 및 바이로이드 5종 중에서 가장 높은 감염률을 보인 바이러스로 전체 감염률은 93.4%였다. 특히 조사 대상 16개 사과원 중 7개 사과원은 100% 감염률을 보였으며, 100%가 아닌 사과원도 최소 감염률이 50%가 넘어서 전국적으로 이미 많은 사과나무가 감염되었으므로 본 연구의 조사 대상의 바이러스 중 가장 관리가 시급한 바이러스로 판단된다.
Apple mosaic virus (ApMV).
ApMV의 전체 감염률은 3.6%로 본 연구의 대상 바이러스 및 바이로이드 중 가장 낮은 감염률을 보였다. 16개 사과원 중 10개 과원의 감염률은 0%인 것으로 나타으며, 무주의 P 농가의 자홍 품종을 제외하면 사과원당 감염률이 10%을 넘지 않았다. Pertzik와 Lenz (2011)에 따르면 ApMV는 종종 ACLSV와 ASPV와 함께 발생하지만 감염 빈도는 훨씬 적었다고 보고하였으며, Cho (2015)에 따르면 국내 사과나무의 ACLSV, ASGV, ASPV의 감염률은 47.6%인 반면 ApMV는 발생되지 않았음을 보고하였다.
본 연구에서도 이 연구들과 마찬가지로 ApMV가 ACLSV와 ASPV와 복합 감염된 경우가 많았으며, 감염률은 ApMV가 ACLSV, ASPV보다 극히 낮은 것으로 조사되었다.
Apple scar skin viroid (ASSVd).
ASSVd의 전국 감염률은 6.7%은 대부분의 사과원에서 감염률이 0%였으나, 정선의 D 농가의 경우 후지 66.7%, 홍로 40.0%로 매우 높은 감염률을 보여 ASSVd에게 유리한 조건이 갖추어지면 언제든 높은 전염력을 가질 수 있을 것으로 판단됨에 따라 ASSVd의 전염력에 대한 추가연구가 수행되어야 할 것이다.
현재 국내 사과원에 바이러스 및 바이로이드는 매우 높은 감염률을 보여주고 있어 당장 시급한 대책이 필요한 실정이다. 하지만 바이러스 및 바이로이드의 경우 현재 치료 방법이 개발되어 있지 않아, 매개충 방제, 농자재 소독 등 예방에만 그 노력이 치우쳐 있으나, 본 연구 결과에서도 알 수 있듯이 이미 바이러스 및 바이로이드는 많은 농가에 전염되어 있어 어찌 보면 예방은 그 효과가 적을 것으로 판단된다. 따라서 실질적인 대안이 필요한데 최근 조직배양 기술을 이용해 사과 무병묘 생산 기술 개발이 시도되고 있으며(Kwon 등, 2019; Lee 등, 2013; Wang 등, 2006), 또한 일부 묘목상에서 무병묘를 보급하고 있다. 다만 다년생인 나무의 특성상 한번 식재를 하면 외부적 요인에 의해 나무가 고사하지 않는 이상 대부분의 과수원에서는 나무를 갱신을 하는 경우가 드물다. 따라서 신규 조성 과원을 시작으로 검증된 사과 바이러스 무병묘를 식재하도록 하고, 신규 과원과 기존 과원으로 대상으로 지속적인 감염률 조사를 통해 더 이상 감염 및 확산되는 것을 차단시켜야 할 것이다.
본 연구는 위에서 언급한 5종의 바이러스 및 바이로이드만을 대상으로 하였으며, 또한 바이러스 및 바이로이드 검출 시 동일한 사과나무 내에서 여러 부위를 사용하지 않고 신초만을 사용하여 검출을 시도하였다. 물론 다양한 부위에서 검출을 시도하는 것이 정확도 측면에서는 더 나은 방법일 수 있으나, 그 대신 좀 더 다양한 지역, 다양한 사과원에서에서 많은 사과나무를 대상으로 조사를 수행하여 전국적인 사과 바이러스 및 바이로이드의 경향치를 보고자 하였다. 실제 본 연구는 780주의 사과나무를 대상으로 조사를 수행하였다.
요 약
사과 바이러스 4종(Apple chlorotic leaf spot virus [ACLSV], Apple stem pitting virus [ASPV], Apple stem grooving virus [ASGV], Apple mosaic virus [ApMV]), 바이로이드 1종(Apple scar skin viroid [ASSVd])을 대상으로 국내 감염률을 조사한 결과, 감염률은 97.3%로 대부분의 사과나무가 바이러스 및 바이로이드에 감염되어 있는 것으로 조사되었다. 지역별로는 정선 98.8%, 단양 100%, 예산 100%, 장수 89.1%, 무주 98.1%였으며, 바이러스 및 바이로이드 각각의 감염률은 ASGV 93.4%, ASPV 85.7%, ACLSV 59.0%, ASSVd 6.7%, ApMV 3.6% 순으로 ASGV의 감염률이 가장 높았고 ApMV의 감염률이 가장 낮은 것으로 조사되었다. 또한, 바이러스 및 바이로이드 2종 이상 복합 감염 비율은 84.8%로 단 1종만 감염된 비율인 12.4%와 비교하여 약 7배 가까이 되는 것으로 조사되었다.
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